Фрагментация ДНК сперматозоидов исследование, норма индекса

Фрагментация ДНК сперматозоидов

Фрагментация ДНК сперматозоидов

Для зачатия и рождения здорового ребенка важную роль играет генетика. Генетический материал от отца несут сперматозоиды. Что такое фрагментация ДНК сперматозоидов? Обязательно ли сдавать этот анализ? И что делать, если она повышена? Рассказывает специалист лаборатории сперматологии Сэм.

Согласно Всемирной Организации Здравоохранения (2000г.) около 10-20% супружеских пар репродуктивного возраста бесплодны, в половине случае из которых, причиной этого является мужской фактор. Для зачатия ребенка, протекания беременности без осложнений и рождения здорового потомства большую роль играет генетика, а именно тот генетический материал, который родители передадут своему будущему ребенку. Генетический материал от отца несут в себе мужские половые клетки сперматозоиды. Но как проверить, что в них не повреждена молекула ДНК? В настоящее время, особенно с повышенным применением ВРТ (вспомогательных репродуктивных технологий), в клиническую практику все увереннее входят анализы оценки генетического материала человека. Сдать анализ фрагментации ДНК сперматозоидов можно у нас влаборатории ЦИР!

Спермограмма и фрагментация ДНК сперматозоидов

Что такое фрагментация ДНК сперматозоидов?

Известно, что молекула ДНК состоит из двух спирально закрученных нитей (цепей). Однако под воздействием различных факторов молекула ДНК может повреждаться, в результате чего образуются разрывы, которые могут быть двухцепочечными или одноцепочечными. Разрывы (фрагменты) цепи ДНК нарушают целостность молекулы и, тем самым, снижают шансы наступления и благоприятного протекания беременности.

Рис. 1. Одно- и двухцепочечные разрывы молекулы ДНК.

Ферменты яйцеклетки после оплодотворения могут исправлять до 10% этих повреждений ДНК сперматозоидов, но это будет зависеть от типа повреждения и качества яйцеклетки. Остальные неисправленные разрывы ДНК ведут к нарушению генома эмбриона и остановке развития беременности на ранних сроках, в т.ч. на ранних этапах эмбриогенеза, особенно при применении метода ЭКО (экстракорпорального оплодотворения).

Исследование фрагментации ДНК сперматозоидов представляет собой определение процентного содержания сперматозоидов (индекса фрагментации) с нарушенной целостностью молекулы ДНК.

К чему приводит повышение уровня фрагментации ДНК сперматозоидов?

Сперматозоиды с поврежденной ДНК могут сохранять способность к оплодотворению, но в дальнейшем в эмбриональном развитии плода могут происходить нарушения, часто приводящие к прерыванию беременности. Иногда повреждения ДНК столь значительны, что эмбрион погибает на ранних этапах развития, при которых неудается даже выявить биохимические маркеры беременности. При повышении уровня фрагментации ДНК сперматозоидов снижается частота наступления беременности, увеличивается вероятность спонтанного аборта, а также снижается вероятность успеха ЭКО.

Фрагментация ДНК сперматозоидов и мужское бесплодие в мировых исследованиях

Рис.2. Историческая хронология развития изучения ДНК фрагментации (Rex, A.S., Aagaard, J. and Fedder, J., 2017. DNA fragmentation in spermatozoa: a historical review. Andrology, 5(4), pp.622-630).

Впервые значительную связь между повреждением ДНК сперматозоидов и невынашиванием беременности показали Robinson с соавторами (Великобритания, 2012).

В канадском исследовании авторов Zini A., Albert O., Robaire B в 2014г. было показано, что повышенная фрагментация ДНК сперматозоидов приводит к уменьшению мужского потенциала фертильности, снижению частоты наступления беременности, неразвивающейся беременности, а также снижению эффективности ВРТ. Кроме того, при оплодотворении таким дефектным сперматозоидом увеличивается вероятность наличия хромосомных нарушений и врожденных пороков развития у плода.

К 2015 г. было опубликовано значительное количество литературы о связи между повышенной фрагментацией ДНК и бесплодием, и в этом же году впервые поднимается вопрос о включении теста на фрагментацию ДНК сперматозоидов в перечень рутинных методов диагностики мужского бесплодия.

Все новые и новые исследования говорят о связи между повышенной фрагментацией ДНК сперматозоидов и невынашиванием беременности (Coughlan и соавторы, Великобритания 2015г.; Leach и соав., Австралия, 2015г.; Bareh и соавт., США, 2016г.; Zidi Jrah и соав., Тунис, 2016г.).

Результаты исследования Dorostghoal и др. показали значительно более высокий уровень сперматозоидов с фрагментированной ДНК у бесплодных мужчин, чем у контрольной группы фертильных мужчин. Фрагментация ДНК сперматозоидов, может служить, как новый маркер качества сперматозоидов.

В исследовании Гентского университета Бельгии авторами во главе Comhaire в 2018г. у бесплодных пар была выявлена диагностическая корреляция между индексом фрагментации ДНК сперматозоидов и результатами программ ВРТ. А также Deng и соавторы Научного центра репродуктивной медицины в Китае исследовали 1133 цикла ВРТ и выявили статистическую корреляцию между повышенным индексом фрагментации ДНК и негативным результатом программ ВРТ.

Показания к сдаче анализа

Сдать анализ на фрагментацию ДНК сперматозоидов рекомендуется в следующих случаях:

  • * бесплодие в супружеской паре;
  • * привычное невынашивание беременности;
  • * подготовка к вспомогательным репродуктивным технологиям (ВРТ), в т.ч. ЭКО (экстракорпоральное оплодотворение), ИКСИ (интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида), внутриматочная инсеминация;
  • * неудачные попытки ЭКО;
  • * обнаружение отклонений в спермограмме.
Читайте также:  Рисковое дело что говорит статистика о сексе - BBC News Україна

Причины повышенной фрагментации ДНК сперматозоидов

Причины фрагментации ДНК сперматозоидов не до конца изучены. Считается, что основной причиной фрагментации ДНК является оксидативный стресс, а именно повышение в сперме активных форм кислорода (АФК, Reactive oxygen species, ROS). Избыточное количество активных радикалов кислорода способно разрушать фосфолипидные мембраны и генетический материал сперматозоидов. Основным источником активных форм кислорода являются лейкоциты.

Другими внутренними факторами повышения фрагментации ДНК считают неадекватное созревание сперматозоидов (нарушение конденсации хроматина), нарушение дозревания сперматозоидов в придатках яичек и апоптоз (генетически запрограммированная гибель клеток). Важная роль апоптоза состоит в устранении дефектных клеток, у которых разрушается ДНК. Поэтому чем больше отклонений в спермограмме (астенозооспермия, олигоастенозооспермия, олигоастенозооспермия), тем выше уровень фрагментации ДНК сперматозоидов вследствие апоптоза.

Кроме того, существуют и внешние факторы, которые в той или иной степени могут повышать процент фрагментации ДНК сперматозоидов:

  • * возраст (старше 40 лет);
  • * ожирение;
  • * вредные привычки;
  • * высокие температуры (злоупотребление банями/саунами);
  • * хронические/острые воспалительные заболевания мужской мочеполовой системы;
  • * воздействия ионизирующего излучения (лучевая и/или химиотерапия);
  • * варикоцеле (варикозное расширение вен семенного канатика и яичка).

Где сдать фрагментацию ДНК сперматозоидов?

Наши клиники и лаборатории ЦИР уже 23 года работают в области репродукции. Нам доверяют многие супружеские пары с проблемами бесплодия и невынашивания беременности.

В нашей собственной лаборатории сперматологии мы проводим качественно и быстро до 15 анализов спермы, в том числе и анализ фрагментации ДНК сперматозоидов.

Наши опытные врачи-андрологи и репродуктологи помогут составить план обследования и при необходимости назначить лечение.

Методы фрагментации ДНК сперматозоидов

Прямые методы фрагментации ДНК сперматозоидов – TUNEL, COMET и NT.

К непрямым методам широкое распространены SCSA и SCD (Halosperm).

Метод TUNEL (Transferase mediated dUTP Nick End Labeling). Наибольшей популярностью в настоящее время пользуется этот метод для оценки уровня фрагментации ДНК сперматозоидов. В эякулят добавляется специальное вещество (терминальная трансфераза), после которого разрывы молекул ДНК сперматозоидов прокрашиваются определенным цветом. Под люминесцентным микроскопом проводится подсчет здоровых сперматозоидов, на которые краситель никак не действует (красным цветом), и сперматозоидов с фрагментацией ДНК (зеленым цветом). Преимущество метода заключается в прямом мечении (маркировке) разрывов в ДНК, отсюда следует, что тест имеет высокую чувствительность и специфичность по сравнению с другими методами исследования фрагментации ДНК. Также данный метод позволяет идентифицировать одно- и двухцепочечные разрывы ДНК. Для проведения этой методики необходимо специальное оборудование и высококвалифицированный персонал лаборатории. В нашей Лаборатории ЦИР Вы можете сдать анализ фрагментации ДНК сперматозоидов методом TUNEL.

Рис.3a и 3b. Препараты эякулята под люминесцентным микроскопом. Сперматозоиды с фрагментацией ДНК (зеленым цветом) и сперматозоиды без фрагментации ДНК (красным цветом), окрашенные методом TUNEL.

Метод COMET (Single-cell gel electrophoresis assay, гель-электрофорез единичных клеток) основан на принципах электрофореза, распределяя высоко- и низкомолекулярные ДНК, из которых последняя при электрофорезе напоминает хвост кометы. Чем больше клеток с «хвостом кометы», тем больше имеет место быть фрагментации ДНК. Данный метод высокочувствительный, но требует специального оборудования, не подходящего для использования в клинической лаборатории.

Рис.4. Метод ДНК-комет.

Метод NT (ник-трансляции, ISNT, In-Situ Nick Translation assay) основан на включении радиоактивного тимидина в 3′ -ОН концы фрагментов ДНК с помощью фермента ДНК-полимеразы. В отличие от метода TUNEL данный метод ISNT определяет только одноцепочечные разрывы.

В методах COMET и NT отсутствуют стандарты порогового значения нормы, поэтому они используется только в исследовательских целях.

Метод SCSA (Sperm Chromatin Structure Assay) или определение структуры хроматина по Эвенсону. Это первый разработанный метод определения фрагментации ДНК сперматозоидов. Сначала в образец со сперматозоидами добавляют кислый денатурирующий раствор, а затем специальный краситель акридиновый оранжевый. При связывании красителя с целой двухцепочечной молекулой ДНК наблюдается зеленое свечение, при связывании с разрушенной денатурированной одноцепочечной молекулой ДНК – красное свечение, при наличии умеренной степени повреждения ДНК – желтое свечение. Все это количественно подсчитывается с помощью проточной цитометрии, основой которого является лазерный луч, способный разделить оба типа свечения. Данный метод достаточно высоко чувствителен и специфичен. Сдать фрагментацию ДНК сперматозоидов методом SCSA можно у нас в лаборатории ЦИР!

Метод SCD (Sperm Chromatin Dispersion) или его модификация Halosperm (HALO тест) основан на обнаружении разрывов ДНК по дисперсии хроматина вокруг ядра клетки после гидролиза. Сперматозоиды обрабатывают раствором кислоты, затем после инкубации клетки прокрашивают и просматривают в световом микроскопе. Сперматозоиды, которые содержат целую ДНК, образуют ореол дисперсии («halo-эффект»). Сперматозоиды с фрагментированной ДНК образуют минимальный ореол или не образуют его вообще. Метод прост в использовании, но значительным минусом его является относительно низкая чувствительность и специфичность по сравнению с другими методами исследования фрагментации ДНК.

Рис. 5. Препарат эякулята под световыми микроскопом. Сперматозоиды с целой ДНК (с ореолом дисперсии — «halo-эффект») и сперматозоиды с фрагментированной ДНК (без ореола).

Различают также относительно новый метод исследования фрагментации ДНК – метод DBD-FISH (DNA Break Detection-Fluorescence In Situ Hybridization). В ходе теста сперматозоиды вначале обрабатываются щелочным раствором, который разрушает белки и деспирализует ДНК, а затем средой, содержащей флуоресцентно меченые ДНК-зонды. Зонды связываются с одноцепочечной ДНК. Чем выше степень фрагментации ДНК, тем больше образуется одноцепочечных фрагментов и тем выше степень фрагментации. Этот метод может быть использован для обнаружения повреждения ДНК в определенных областях последовательности генома. В настоящее время технология находится на стадии экспериментального изучения.

Читайте также:  Болит косточка на ноге около большого пальца лечение, причины

Какой метод выбрать ?

Как правило, лечащий врач-андролог при назначении указывает метод исследования фрагментации ДНК сперматозоидов, так как в некоторых клинических случаях может быть предпочтителен тот или иной метод. В остальных случаях пациенту приходится самому выбирать метод анализа, руководствуясь в основном ценой исследования.

В научных исследованиях наибольшую прогностическую значимость с позиции успеха ВРТ показывали методы TUNEL и COMET (L. Simon и др., США, 2014г.; Cissen M. и др., Нидерланды, 2016г.).

В настоящее время наибольшее распространение получил метод TUNEL, так как именно этот метод был использован в большей части исследований, посвященных изучению влияния фрагментации ДНК сперматозоидов на репродуктивные исходы и фертильность.

Прямой метод TUNEL выявляет как одноцепочечные так и двуцепочечные разрывы молекулы ДНК сперматозоидов, таким образом давая больше информации специалисту для оценки вероятности успеха того или иного метода ВРТ.

Что делать если повышен уровень фрагментации ДНК сперматозоидов?

В норме индекс фрагментации должен быть ниже 15%. Всем пациентам с мужским бесплодием, в том числе, ассоциированным с высоким уровнем фрагментации ДНК сперматозоидов, рекомендуется отказаться от вредных привычек и других факторов риска, вести здоровый образ жизни и поддерживать полноценный рацион питания.

При выявлении у пациента с высоким уровнем фрагментации ДНК сперматозоидов с варикоцеле — целесообразна его хирургическая коррекция. К консервативным методам лечения относится назначение антикосидантной терапии и терапии с применением рекомбинантного ФСГ.

Запишитесь к нашим специалистам и получите квалифицированную консультацию по результату анализа, а также рекомендации по лечению при необходимости. Записаться на консультацию в ЦИР

ДНК-фрагментация сперматозоидов

К настоящему времени известно, что для выявления нарушений мужской фертильности наиболее оптимальным является проведение различных исследований эякулята в комплексе.

К настоящему времени известно, что для выявления нарушений мужской фертильности наиболее оптимальным является проведение различных исследований эякулята в комплексе. Так, например, при оценке спермограммы определяют количество и подвижность мужских половых клеток, МАР-тест позволяет определить иммунологические нарушения у мужчины, а при оценке строгой морфологии видны нарушения строения сперматозоидов.

Кроме того, существуют и другие относительно новые, но чрезвычайно информативные методы оценки сперматозоидов. Одним из таких методов является тест на фрагментацию ДНК, с помощью которого можно определить степень разрывов в молекуле ДНК спермиев, что часто приводит к остановке развития эмбриона на любом сроке. Помимо этого, установлено, что, в семейных парах, где у мужчин наблюдается повышенный индекс фрагментации ДНК сперматозоидов, потеря беременности на ранних сроках (до 12 недель) встречается намного чаще, чем в парах с нормальным индексом фрагментации. Своевременное обнаружение и дальнейшая коррекция индекса ДНК-фрагментации с помощью специальной терапии увеличивает шанс наступления и нормального протекания естественной беременности, а также значительно повышает вероятность получить долгожданную беременность с помощью метода ЭКО с первой попытки.

В Красноярском центре репродуктивной медицины анализ оценки фрагментации ДНК сперматозоидов выполняется с 2010 года. За все это время специалисты нашего центра помогли стать счастливыми родителями многим семьям, за период с сентября 2010 по настоящее время у нас родилось более 2500 малышей. Однако хотелось бы остановиться на конкретной истории, в которой благодаря комплексному подходу к оценке эякулята, включая анализ ДНК-фрагментации, удалось достичь главной цели нашей клиники – рождения в семье здорового ребенка. В 2010 году в Красноярский центр репродуктивной медицины обратилась молодая супружеская пара, женщине – 31 год, мужчине – 29 лет. В данной семье беременность не наступала по причине мужского фактора, а именно, было снижено количество прогрессивно-подвижных сперматозоидов в спермограмме, МАР-тест отрицательный, 4% нормальных морфологических форм (по Крюгеру), индекс фрагментации ДНК – 39%. По результатам комплексного исследования эякулята мужчине была предложена метаболическая терапия, которую супружеская пара проходить отказалась вследствие непонимания значимости данного лечения для процедуры ИКСИ. В результате из 11 зрелых ооцитов оплодотворение наступило только у 4 клеток. На 5 сутки развития был выполнен перенос двух эмбрионов, эмбрионы демонстрировали отставание в развитии, оставшиеся после переноса эмбрионы не были пригодны для криоконсервации, результат – отрицательный (рис.1).

Рис.1. Эмбрионы, выбранные для переноса на 5 сутки развития (эмбрионы отстают в развитии, отмечается небольшое количество клеток в составе эмбриона, наличие фрагментации).

По результатам лечебного цикла мужчине снова была предложена метаболическая и антиоксидантная терапия, которая в дальнейшем была им успешно пройдена, т.е. удалось скорректировать число морфологически нормальных форм сперматозоидов и индекса ДНК-фрагментации практически до нормальных значений (22%). В дальнейшем пара снова обратилась в клинику для повторной попытки ЭКО+ИКСИ. Во второй попытке из 22 зрелых ооцитов оплодотворение наступило у 18 клеток, на 5 сутки развития был выполнен перенос двух эмбрионов хорошего качества (эмбрионы соответствовали сроку развития, хорошие морфологические характеристики), дополнительно произведена криоконсервация двух эмбрионов (рис.2). Результат – одноплодная беременность, роды произошли в срок и наши пациенты стали родителями прекрасного мальчика.

Рис.2. Эмбрионы на 5 сутки развития (эмбрионы соответствуют дню развития, хорошая клеточная масса в составе эмбриона, отсутствие фрагментации).

Тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов

Бывают ситуации, когда по результатам обследования супружеская пара абсолютно здорова, а беременность не наступает, либо замирает на ранних сроках. Такую ситуацию называют идиопатическим (без видимых причин) бесплодием.

Читайте также:  Обезвоживание у детей и токсикоз с эксикозом в раннем возрасте Симптомы и лечение обезвоживания у р

Однако, в результате исследований было установлено, что одной из причин мужского бесплодия является повреждение генетического материала сперматозоидов — фрагментация ДНК.

Содержание

  • Фрагментация ДНК сперматозоида и мужское бесплодие
  • Почему происходит повреждение ДНК
  • В каких случаях назначают тест на фрагментацию ДНК
  • Как выполняется тест на фрагментацию ДНК
  • Что показывает индекс фрагментации ДНК (ИФД)
  • Где сделать Фрагментацию ДНК в Красноярске?

Фрагментация ДНК сперматозоида и мужское бесплодие

Спермограмма — золотой стандарт первичной оценки качества спермы. Нормы спермограммы с оценкой морфологи по Крюгеру установлены ВОЗ в 2010 году. Однако спермограмма не объясняет и половины случаев мужского бесплодия. В результате были разработаны другие методы исследования, такие как MAT-тест и Фрагментация ДНК сперматозоидов.

Сегодня уже доказано, что нарушение оплодотворения, замершая беременность (остановка развития эмбриона), повторяющиеся выкидыши на ранних сроках — напрямую связаны с повреждением (фрагментацией) цепочки ДНК в головке сперматозоида.

Установлено, что 8-10% мужчин с идиопатическим бесплодием и нормальными показателями спермограммы имеют высокий процент сперматозоидов с фрагментацией ДНК. При этом отмечается резкое снижение вероятности естественного зачатия, низкая эффективность искусственной инсеминации спермой мужа и ЭКО.

В цепочке ДНК сперматозоида закодирована генетическая информация, которая передается ребенку при слиянии с яйцеклеткой. Чем больше фрагментирована ДНК, тем меньше вероятность оплодотворения и выше риск генетических отклонений у плода. Сперматозоиды с поврежденной ДНК могут сохранять хорошую подвижность и способность к оплодотворению, но наступившая беременность замирает на ранних сроках.

Почему происходит повреждение ДНК

Повреждение молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты может произойти как в созревающей, так и в созревшей мужской половой клетке. Разрывы в цепочке ДНК следствие воздействия на нее свободных радикалов. Радикалы окисляют аминокислоты, связи меду ними рвутся, в результате спираль молекулы ДНК рвется. Образование свободных радикалов в организме возрастает под воздействием неблагоприятных факторов, к которым относятся:

Внешние факторы:

  • Радиация, токсические химические вещества (химиотерапия), высокая температура;
  • Курение, злоупотребление алкоголем;
  • Инфекции, в том числе передающиеся половым путем;
  • Неблагоприятные климатические и экологические условия в районе проживания;
  • Стресс, нездоровое питание (пища бедная антиоксидантами);
  • Варикоцеле, варикозное расширение вен семенного канатика и яичка;
  • Возраст мужчины старше 40–45 лет;
  • Хронические воспалительные заболевания органов мочеполового тракта;

Внутренние факторы:

В каких случаях назначают тест на фрагментацию ДНК

Иследование следует провести в следующих клинических ситуациях:

  • Идиопатическое (необъяснимое) мужское бесплодие;
  • Замершая беременность (остановка развития эмбриона);
  • Повторяющиеся выкидыши;
  • Безуспешные попытки инсеминации и ЭКО
  • Возраст мужчины 45 лет и более;
  • Отклонения в результатах спермограммы;
  • Перед крио-консервацией спермы.

Мы рекомендуем всем парам планирующим воспользоваться ВРТ (вспомогательные репродуктивные технологии), пройти тест на фрагментацию ДНК. Это поможет, не тратя время, определить какой именно из методов ВРТ: инсеминация, ЭКО или ИКСИ, поможет в вашем случае.

Как выполняется тест на фрагментацию ДНК

Сперма собирается обычным способом. Как поготовиться к анализу и правильно собрать сперму читайте здесь.

В нашей лаборатории оценка фрагментации ДНК выполняется методом SCD (запатентован компанией Halotech) . Этот метод активно используется в клинической практике и участвует во множестве клинических испытаний. HALO считается более чувствительным тестом, по сравнению с остальными.

Методика

Через 30-60 минут после разжижения в эякулят добавляют специальный реактив, он связывается с неповрежденной ДНК сперматозоидов (с поврежденной не связывается или в очень малых количествах).

Далее сперму исследют через электронный микроскоп в спецальном свете. Оценивают только зрелые формы сперматозоидов (с хвостами), от 200 до 500 штук.

При микроскопии подсвечиваются здоровые клетки — вокруг головки сперматозоида виден светящийся ореол. Если ДНК имеет повреждения, то свечения нет или ореол очень тонкий и неявный.

Результат посчета выражается в индексе фрагментации ДНК (ИФД). Он отражает процентное соотношение между «здоровыми» сперматозоидами и сперматозоидами с фрагментацией ДНК, в норме он должен быть не более 20%.

Что показывает индекс фрагментации ДНК (ИФД)

ИФД 60%

Если результат выше 60% шансы на беременность даже с применением вспомогательных репродуктивных технологий крайне низкие. Лучше использовать сперму донора.

Существуют данные исследований, подтверждающие, что женская яйцеклетка восстанавливает поврежденную ДНК оплодотворившего сперматозоида. Эта способность напрямую зависит от возраста и здоровья женщины. Только «молодые» яйцеклетки обладают высоким потенциалом восстановления и способны устранить дефект ДНК сперматозоида.

Лаборатория анализа спермы в Красноярске

Расписание приема спермы:

Пн, Вт, Птн — 09:00-11:00, на Затонской 7, в Андро-гинекологической клинике
Предварительная запись по телефону: +7 (391) 201-11-92

Анализ спермы в Андро-гинекологической клинике выполняется на автоматической компьютерной системе анализа спермы «CASA». Она осуществляет объективный количественный анализ образца спермы человека в соответствии с критериями, установленными Всемирной Организацией Здравоохранения (ВОЗ).

  • Технология соответствует требованиям и нормам ВОЗ;
  • Экспертное оборудование;
  • Профессиональный уровень врачей;
  • Консультация со схемой лечения.

Мы проводим следующие виды анализов эякулята:

Cпермограмма — оценка физических свойств эякулята и морфологии сперматозоидов.
MAR-тест — является основным методом определения иммунного фактора бесплодия.
Жизнеспособность сперматозоидов — оценка функциональной патологии сперматозоидов.
Фрагментация ДНК — оценка ДНК сперматозоидов.

Как подготовиться к спермограмме читайте в этой статье

Цены на анализы эякулята смотрите в прайсе «Лаборатория»

Ссылка на основную публикацию
Флемоксин солютаб инструкция по применению, классификация, статьи » Справочник ЛС
Понос после антибиотиков (или антибиотик-ассоциированная диарея). Главная > Консультации > Детский врач > Понос после антибиотиков (или антибиотик-ассоциированная диарея). Структура...
Фезам инструкция по применению показания, противопоказания, побочное действие – описание Phezam капс
Фезам Инструкция по применению Форма выпуска, состав и упаковка Фезам, как указано в инструкции по применению, выпускают в виде капсул....
Фейсбилдинг пять упражнений для гимнастики лица в домашних условиях
Фейсбилдинг: пять упражнений для гимнастики лица в домашних условиях Морщины и обвисания на лице происходят из-за мышечного дисбаланса. Фото: GLOBAL...
Флогэнзим инструкция по применению показания, противопоказания, побочное действие – описание Phlogen
Флогэнзим Состав В одной таблетке Флогэнзима содержится 450 ед. бромелаина, 1440 ед. трипсина и 100 мг рутина. Также, в состав...
Adblock detector